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    • 冬蝶鱼皮肤型抗冻蛋白的克隆及表达 

      颜青; 林青松; 丘才良 (1999)
      冬蝶鱼皮肤型抗冻蛋白(W fS A f P)的克隆和表达,是研究抗冻蛋白抗冻机制的重要步骤之一,有助于揭示抗冻蛋白分子结构与活力的关系.用 P C r 法获得 W fS A f P 基因片段,构建了分泌型表达载体 PlAC I QPAr8W fS A f P.用 W ESTErn blOT 法测其表达水平,氨基酸组成分析及质谱分析证明表达的蛋白与天然蛋白完全一致,并具有天然蛋白相同的活力.
    • 抗冻蛋白基因定向突变及其抗冻关系的研究 

      颜青; 林青松; 丘才良 (2001-08-10)
      为探讨抗冻蛋白的抗冻机制 ,根据抗冻活力较高的肝型抗冻蛋白的氨基酸组成 ,改造皮肤型抗冻蛋白基因 ,使皮肤型抗冻蛋白基因的第 10位氨基酸 -丙氨酸 (A)改造成天冬氨酸 (D) .方法 :合成一段含有突变位点的 DNA片段 ,用其取代野生型 DNA上相对应的片段 ,DNA测序法筛选阳性克隆并表达该蛋白 ,Western- blot法、氨基酸组成分析法、及质谱法鉴定表达蛋白 ,测定突变后抗冻蛋白的活力并与野生型比较 ,以期揭示抗冻蛋白的抗冻机制