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    • β-葡萄糖苷酶的异源表达及与纤维素酶协同酶解竹纤维 

      成奕瑾; 张婷; 黎海龙; 龙传南; 刘健; 龙敏南 (2013-12-15)
      在毕赤酵母gS115中表达东方肉座菌Eu7-22的β-葡萄糖苷酶基因(bgl),获得基因工程菌株bP17。优化bP17収酵产酶条件后,重组β-葡萄糖苷酶活力达121 Iu/Ml。酶学性质研究表明,该酶最适反应温度为70℃,在60℃以下有较好的热稳定性;最适催化PH为5.0,在PH 3.0~8.0之间有较好的稳定性。将异源表达的β-葡萄糖苷酶添加到东方肉座菌的纤维素酶液中协同降解经过预处理的竹纤维,当纤维素酶添加量为fPA 20 ...
    • 东方肉座菌EU7-22木聚糖酶和木糖苷酶基因克隆及生物信息学研究 

      龙传南; 蒋凤姣; 邬小兵; 刘健; 龙敏南 (2013-03-15)
      东方肉座菌Eu7-22具有高产半纤维素酶的能力。根据已报道的同属里氏木霉及绿色木霉木聚糖酶,木糖苷酶相关基因序列,设计PCr引物扩增出东方肉座菌内切木聚糖酶(XynⅠ,XynⅡ)及β-木糖苷酶(β-bXl)基因。序列经nCbIblAST分析:东方肉座菌XynⅠ基因与里氏木霉Xyn1基因(X69573.1)的同源性最高达到91%;XynⅡ基因与绿色木霉Xyn2基因(Ef079061)同源性最高达到93%;β-bXl基因与里氏木霉β-bXl ...
    • 东方肉座菌EU7-22木聚糖酶基因克隆与异源表达 

      蒋凤姣 (2014-02-26)
      木聚糖是一种多聚五碳糖,是半纤维素的主要成份,广泛的分布于植物细胞壁中,是除纤维素外自然界中最为丰富的可再生资源多糖,约占植物生物质总量的15%~35%。木聚糖主链通过β-1,4-糖苷键将木糖残基连接而成,侧链上带有不同的取代基。由于木聚糖的复杂结构,它的完全降解需要多步酶促反应完成。内切β-1,4-木聚糖酶(EC3.2.1.8)是最重要的酶之一,作用于木聚糖主链内β-1,4-糖苷键,生成木寡糖和木糖。由于木聚糖酶具有广泛的工业应用前景 ...
    • 东方肉座菌EU7-22纤维素降解酶系及其基因表达的研究 

      龙传南 (2014-02-26)
      随着石油资源的日渐枯竭以及人类对能源需求的增长,寻求廉价的、清洁的可再生能源已成为世界各国共同目标。纤维素生物质是地球上最重要的可再生资源,全球每年通过植物光合作用合成的生物质高达2000亿吨以上。纤维素酶和半纤维素酶是一种生物催化剂,它能有效地将纤维素生物质水解成糖类物质,通过进一步转化加工成人类所必需的生物基燃料、生物基化学品和生物基材料。纤维素生物质的利用与转化对于解决环境污染以及能源危机等问题具有十分重要的意义。纤维素酶与半纤维 ...
    • 东方肉座菌GH10家族木聚糖酶基因的克隆及异源表达 

      吴金连; 薛勇; 黎海龙; 刘健; 甘礼惠; 龙敏南 (2015-10-18)
      木聚糖酶是降解半纤维素最主要的酶,对于开发可再生生物能源具有重要的应用价值。分别以东方肉座菌(HyPOCrEA OrIEnTAlIS)Eu7-22的基因组dnA和C dnA为模板,利用染色体步移和PCr技术首次克隆获得该菌gH10家族木聚糖酶Ⅲ的基因(XynⅢ),并对其进行生物信息学分析。结果表明:该基因全长1283 bP(gXynⅢ),含有3个内含子;CdS序列为1044 bP(CXynⅢ),编码347个氨基酸,n端含有一个16 ...
    • 东方肉座菌β-葡萄糖苷酶酶学性质及其基因克隆 

      许鑫琦 (2017-03-23)
      利用纤维素酶降解木质纤维素用以生产燃料乙醇是应对化石能源枯竭的有潜力途径,β-葡萄糖苷酶是纤维素酶关键成分之一,本文以东方肉座菌(HypocreaorientalisEU7-22)为来源,经过产酶发酵、离心、硫酸铵逐级盐析、SephacrylS-200凝胶层析、DEAESepharoseFF离子柱层析以及SuperdexS75凝胶层析,获得比活力为1783.6U/mg的电泳单一纯β-葡萄糖苷酶(β-1,4-glucosidase,简称B ...
    • 东方肉座菌纤维素酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达 

      成奕瑾 (2015-04-16)
      纤维素生物质是地球上最丰富的可再生资源,利用它可以生产燃料乙醇等生物液体燃料,进而缓解全世界日益突出的能源危机和环境污染问题。然而,由于纤维素生物质结构的特殊性,工业上将其水解为可发酵糖的生产成本过高,成为燃料乙醇炼制过程中的瓶颈。纤维素的酶法水解因条件温和、副产物少、环境友好等特点受到广泛重视。利用基因工程手段外源高效表达纤维素酶是降低纤维素酶生产成本的途径之一。 本论文以东方肉座菌EU7-22为研究对象,利用RT-PCR技术克隆出7 ...
    • 乳酸对东方肉座菌beta-葡萄糖苷酶的抑制动力学 

      许鑫琦; 郎斌; 邬小兵; 林娟; 陈清西 (2017)
      为探讨糖化共发酵同步进行的过程中发酵产物对纤维素酶活力的影响,研究了乳酸对纤维素酶组分中beta-葡萄糖苷酶(BG)活力的影响.结果显示:乳酸对; BG活力有不同程度的抑制,该作用具有显著的浓度效应,其半抑制浓度$I{C_{50}} = 019$; mol/L;乳酸对BG的抑制类型是可逆的竞争性抑制,抑制常数${K_1} = 0.149$; mol/L.应用底物反应动力学方法研究酶抑制动力学,建立了抑制动力学模型,发现乳酸对BG的影响是 ...